■ 基本信息
別名: | pET-Duet |
啟動(dòng)子: | T7 |
復(fù)制子: | pBR322 |
終止子: | T7 terminator |
質(zhì)粒分類(lèi): | 大腸桿菌載體；雙表達(dá)框質(zhì)粒 |
質(zhì)粒大小: | 5420bp |
質(zhì)粒標(biāo)簽: | N-6×His,C-S |
原核抗性: | Amp |
克隆菌株: | DH5a |
培養(yǎng)條件: | 37度，37℃，有氧，LB |
表達(dá)宿主: | BL21(DE3) |
誘導(dǎo)方式: | IPTG或乳糖及其類(lèi)似物 |
5'測(cè)序引物: | pET Upstream：ATGCGTCCGGCGTAGA DuetUP2:TTGTACACGGCCGCATAATC |
3'測(cè)序引物:
| DuetDOWN1:GATTAGCGGCCGTGTACAA T7-ter:TGCTAGTTATTGCTCAGCGG |
備注: | 同時(shí)表達(dá)兩個(gè)外源蛋白 |
■ 質(zhì)粒屬性
質(zhì)粒宿主: | 大腸桿菌 |
質(zhì)粒用途: | 蛋白表達(dá) |
片段類(lèi)型: | ORF
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片段物種: | 多框空載
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原核抗性: | Amp |
真核抗性: |
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熒光標(biāo)記: |
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■ 質(zhì)粒簡(jiǎn)介
pETDuet-1載體被設(shè)計(jì)用來(lái)在大腸桿菌中同時(shí)表達(dá)兩個(gè)外源基因. 載體含有兩個(gè)多克隆位點(diǎn)，每一個(gè)多克隆位點(diǎn)是通過(guò)T7啟動(dòng)子/Lac操縱子和一個(gè)核糖體結(jié)合位點(diǎn)組成。pETDuet-1攜帶有pBR322質(zhì)粒來(lái)源的ColE1復(fù)制子, lacI基因和氨芐抗性基因。本載體可以與pACYCDuet-1載體聯(lián)合使用，在合適的宿主菌中，可以一起共表達(dá)至多4個(gè)目的基因。插入在pETDuet-1載體多克隆位點(diǎn)1的目的基因可以使用pET Upstream 引物和DuetDOWN1 引物進(jìn)行測(cè)序，插入在多克隆位點(diǎn)2的目的基因可以通過(guò)DuetUP2 引物 和T7 Terminator 引物進(jìn)行目的基因測(cè)序。
■ 質(zhì)粒圖譜
■ 質(zhì)粒序列
質(zhì)粒序列請(qǐng)下載：
ZK1684 pETDuet-1大腸雙表達(dá)質(zhì)粒.txt
