■ 基本信息
別名: | pRSET A |
啟動(dòng)子: | T7 |
復(fù)制子: | pUC |
終止子: | T7 terminator |
質(zhì)粒分類(lèi): | 大腸桿菌載體；pRSET系列表達(dá)質(zhì)粒 |
質(zhì)粒大小: | 2897bp |
質(zhì)粒標(biāo)簽: | N-His，N-EK，N-Xpress |
原核抗性: | Amp |
克隆菌株: | DH5a |
培養(yǎng)條件: | 37度，37℃，有氧，LB |
表達(dá)宿主: | BL21(DE3)系列，推薦BL21Star（DE3) |
誘導(dǎo)方式: | IPTG或乳糖及其類(lèi)似物 |
5'測(cè)序引物: | T7:TAATACGACTCACTATAGGG |
3'測(cè)序引物:
| T7-ter:TGCTAGTTATTGCTCAGCGG |
備注: | pRSET表達(dá)質(zhì)粒 |
■ 質(zhì)粒屬性
質(zhì)粒宿主: | 大腸桿菌 |
質(zhì)粒用途: | 蛋白表達(dá) |
片段類(lèi)型: | ORF
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片段物種: | 空載體
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原核抗性: | Amp |
真核抗性: |
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熒光標(biāo)記: |
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■ 質(zhì)粒簡(jiǎn)介
pRSET A載體是從pUC的載體衍生而來(lái)，載體設(shè)計(jì)的目的是為了在大腸桿菌中高水平的表達(dá)和純化目的克隆基因。載體上的T7啟動(dòng)子使得pRSETA載體高水平表達(dá)克隆的基因序列成為可能。此外，DNA插入片段的位于載體上面的下游側(cè)，并能夠上游的蛋白編碼框相一致，上游的編碼序列表達(dá)了一個(gè)N-端融合的肽。該序列包括一個(gè)ATG翻譯起始密碼子，一個(gè)6 X His標(biāo)簽，一個(gè)來(lái)源于噬菌體T7基因10的轉(zhuǎn)錄穩(wěn)定序列，Xpress抗原表位，以及一個(gè)腸激酶裂解識(shí)別序列。His 標(biāo)簽允許簡(jiǎn)單的Ni柱蛋白純化。腸激酶識(shí)別位點(diǎn)位于His標(biāo)簽和重組蛋白之間，可以隨后方便的去除重組蛋白的N-端的融合肽。
■ 質(zhì)粒圖譜
■ 質(zhì)粒序列
質(zhì)粒序列請(qǐng)下載：
ZK1615 pRSETA大腸表達(dá)質(zhì)粒.txt
