■ 基本信息
別名: | pETGST |
啟動子: | T7 |
復制子: | pBR322 |
終止子: | T7 terminator |
質粒分類: | 大腸桿菌載體;PET系列表達質粒 |
質粒大小: | 3.7kb |
質粒標簽: | N-GST,C-6×His,N-P3C |
原核抗性: | Amp |
克隆菌株: | DH5α |
培養(yǎng)條件: | 37℃ |
表達宿主: | BL21(DE3) |
誘導方式: | IPTG或乳糖及其類似物 |
5'測序引物: | T7:TAATACGACTCACTATAGGG |
3'測序引物: | T7-ter:TGCTAGTTATTGCTCAGCGG |
■ 質粒屬性
質粒宿主: | 大腸桿菌 |
質粒用途: | 蛋白表達 |
片段類型: | 基因CDS
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片段物種: | 空載體
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原核抗性: | Amp |
真核抗性: |
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熒光標記: |
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■ 質粒簡介
pET—GST表達載體采用T7啟動子和GST融合表達,同時選用人鼻病毒14亞型3C蛋白酶專一性切割位點。此外,C端還添加了6個His,便于采用chelating sepharose親和層析。本載體表達的融合蛋白可采用吸附GST的親和層析和6個His的chelating sepharose雙重親和層析,極大地方便了下游純化。GST融合表達背景文獻在medline里極為豐富,有數百個基因采用GST融合表達成功。
■ 質粒圖譜
■ 質粒序列
部分序列,僅供參考:
1 tccccgcgcg ttggccgatt cattaatgca ggatctcgat cccgcgaaat taatacgact
61 cactataggg agaccacaac ggtttccctc tagatcacac aggaaacagt attcatgtcc
121 cctatactag gttattggaa aattaagggc cttgtgcaac ccactcgact tcttttggaa
181 tatcttgaag aaaaatatga agagcatttg tatgagcgcg atgaaggtga taaatggcga
241 aacaaaaagt ttgaattggg tttggagttt cccaatcttc cttattatat tgatggtgat
301 gttaaattaa cacagtctat ggccatcata cgttatatag ctgacaagca caacatgttg
361 ggtggttgtc caaaagagcg tgcagagatt tcaatgcttg aaggagcggt tttggatatt
421 agatacggtg tttcgagaat tgcatatagt aaagactttg aaactctcaa agttgatttt
481 cttagcaagc tacctgaaat gctgaaaatg ttcgaagatc gtttatgtca taaaacatat
541 ttaaatggtg atcatgtaac ccatcctgac ttcatgttgt atgacgctct tgatgttgtt
601 ttatacatgg acccaatgtg cctggatgcg ttcccaaaat tagtttgttt taaaaaacgt
661 attgaagcta tcccacaaat tgataagtac ttgaaatcca gcaagtatat agcatggcct
721 ttgcagggct ggcaagccac gtttggtggt ggcgaccatc ctccaaaatc ggacagcatg
781 ccagactctc tcgaagttct gtttcagggt ccagcaggat ccgcagaatt cagcgctagc
841 caccatcatc atcatcatta agcttgatcc ggctgct
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