■ 基本信息
別名: | pBR-322 |
復(fù)制子: | pBR322 |
質(zhì)粒分類: | 大腸系列質(zhì)粒；大腸克隆質(zhì)粒；基因克隆質(zhì)粒 |
質(zhì)粒大小: | 4361bp |
原核抗性: | Amp,Tet |
克隆菌株: | DH5a |
培養(yǎng)條件: | 37度 |
5'測序引物: | PBR322.F（AAGTGCCACCTGACGTCTAA） |
3'測序引物: | PBR322.R (GCCTGCCACCATACCCAC ) |
備注: | 應(yīng)用很廣的基因克隆質(zhì)粒 |
■ 質(zhì)粒屬性
質(zhì)粒宿主: | 大腸桿菌 |
質(zhì)粒用途: | 基因模板 |
片段類型: | cDNA
|
片段物種: | 空載體
|
原核抗性: | Amp,Tet |
真核抗性: |
|
熒光標(biāo)記: |
|
■ 質(zhì)粒簡介
pBR322質(zhì)粒相對分子質(zhì)量較小，它帶有一個(gè)復(fù)制起始位點(diǎn)，保證了該質(zhì)粒只在大腸桿菌的細(xì)胞中行使復(fù)制的功能。具有兩種抗生素抗性基因——氨芐青霉素抗性基因和四環(huán)素抗性基因，可供轉(zhuǎn)化子的選擇標(biāo)記。具有較高的拷貝數(shù)，經(jīng)過氯霉素?cái)U(kuò)增以后，每個(gè)細(xì)胞中可累積1000-3000份拷貝，該特性為重組體DNA的制備提供了極大的方便。同時(shí)，由于其為人工構(gòu)建質(zhì)粒，雖然帶有抗藥性基因，但已不能在自然界的宿主細(xì)胞間轉(zhuǎn)移，同時(shí)應(yīng)用安全菌株，亦不會引起抗生素抗性基因傳播。
pBR322是一個(gè)人工構(gòu)建的重要質(zhì)粒，有萬能質(zhì)粒之稱。它是由pSF2124、pMB1及pSC101三個(gè)親本質(zhì)粒經(jīng)復(fù)雜的重組過程構(gòu)建而成的。質(zhì)粒載體pBR322是研究得最多，使用最早且應(yīng)用最廣泛的大腸桿菌質(zhì)粒載體之一。符號質(zhì)粒載體pBR322中的“p代表質(zhì)粒；“BR”代表兩位兩位研究者Bolivar和Rogigerus姓氏的字首，“322”是實(shí)驗(yàn)編號。
質(zhì)粒載體pBR322的大小為4361bp，相對分子質(zhì)量較小的是它第一個(gè)優(yōu)點(diǎn)。優(yōu)點(diǎn)之二是它帶有一個(gè)復(fù)制起始位點(diǎn)，保證了該質(zhì)粒只在大腸桿菌的細(xì)胞中行使復(fù)制的功能。具有兩種抗生素抗性基因——氨芐青霉素抗性基因和四環(huán)素抗性基因，可供轉(zhuǎn)化子的選擇標(biāo)記是它的第三個(gè)優(yōu)點(diǎn)。質(zhì)粒只保證關(guān)鍵序列正確，不保證表達(dá)效果。
■ 質(zhì)粒圖譜
■ 質(zhì)粒序列
質(zhì)粒序列可參考（具體以測序?yàn)闇?zhǔn)）下載：
ZK116pBR322大腸克隆質(zhì)粒.txt
