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產(chǎn)品名稱:CMCC(B)50094乙型副傷寒沙門氏菌

貨號 規(guī)格 價格 訂購數(shù)量 是否現(xiàn)貨
ZK3717 10珠/管 580 - + 有貨

產(chǎn)品介紹

菌株為乙型副傷寒沙門氏菌,凍存管磁珠保存。

培養(yǎng)條件:營養(yǎng)瓊脂、細菌保存培養(yǎng)基 或 胰酪胨大豆瓊脂培養(yǎng)基,35℃ 培養(yǎng) 24—48 小時。保存溫度:25℃。如需保存,則挑取單菌落接種至細菌保存培養(yǎng)基斜面,每月轉(zhuǎn)接1次,5代后應(yīng)銷毀。


產(chǎn)品保存原理

凍存管里的小瓷珠表面多孔,細菌可以很方便的吸附在上面。凍存管接種上細菌后,可放置于-20℃或-80℃環(huán)境中長期保存(-20℃可保存一年,-80℃可保存二年)。當需要復蘇菌株時,可以很方便的從凍存管中取出單個的小瓷珠,直接接種到合適的細菌培養(yǎng)基上(平板培養(yǎng)基或液體培養(yǎng)基)。


菌株復蘇

1、準備器材

相應(yīng)的細菌增菌培養(yǎng)基、試管、接種環(huán)、試管架、鑷子、酒精燈、酒精棉、記號筆等。

2、菌株復蘇需要再無菌的條件下進行,操作環(huán)境符合相關(guān)標準。

3、操作方法

3.1 根據(jù)不同菌株的生長要求,配置相應(yīng)的增菌液,分裝試管中進行相應(yīng)增菌液的滅菌溫度進行滅菌,滅菌后在放置室溫備用。

3.2 菌種管開啟方法:用浸過75%酒精的脫脂棉擦凈菌種管;將菌種管頂端在火焰上加熱,注意避免直接加熱菌體或加熱過度。

3.3 接種方式

3.3.1 增菌肉湯的制備:取出凍存管并用力搖晃,使管內(nèi)瓷珠分散。無菌條件下擰開凍存管,用無菌的接種環(huán)(接種針)或鑷子取出1個小瓷珠,擰緊瓶蓋;將小瓷珠放置于滅菌后溫度在室溫的增菌液肉湯中。

3.3.2 劃線接種:將手持金屬接種環(huán),用酒精燈將接種環(huán)(共約5 公分)燒至火紅,并不斷來回燒烤金屬固定桿之前約 10 公分,等待約10 秒鐘,將接種環(huán)前端輕觸培養(yǎng)基邊緣凝膠(無菌體部份),待接種環(huán)完全冷卻后,取出凍存管并用力搖晃,使管內(nèi)瓷珠分散。無菌條件下擰開凍存管,用無菌的接種環(huán)(接種針)取出1個小瓷珠或者菌液,擰緊瓶蓋;將小瓷珠在相應(yīng)的固體培養(yǎng)基邊緣向中央輕輕橫劃緊接的并行線,直到涵蓋1/3 培養(yǎng)基為止(I 區(qū)),灼燒接種環(huán),待數(shù)秒冷卻后,旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)基自 I 區(qū)涂布的邊緣再橫劃數(shù)條線到未接種的區(qū)域(II 區(qū)), 重復的動作完成 III 區(qū)與 IV 區(qū)。灼燒接種環(huán),將接種環(huán)歸位。


3.4 盡可能快地將凍存管放回原來的保存環(huán)境,溫度過多改變將減弱細菌的生存能力;

3.5 培養(yǎng)箱中進行增菌肉湯及平板的培養(yǎng)根據(jù)細菌的要求培養(yǎng):

  細菌要求在35+1℃培養(yǎng),12~24小時;

  真菌要求在25+1℃培養(yǎng),24~48小時;

  厭氧菌需要提供厭氧條件。


菌株保存

1、瓷珠保存法:

1.1 使用前,用油性筆在每個凍存管上標記上細菌的名稱,每支凍存管只可接種一種細菌;

1.2 在無菌條件下,打開凍存管的螺旋瓶蓋;

1.3 用接種環(huán)挑取18-24小時新鮮細菌純培養(yǎng)物,放入凍存液中。擰緊瓶蓋,來回顛倒使細菌乳化,配成大約3-4麥氏比濁度的菌懸液,此時細菌懸液會吸附在小瓷珠內(nèi)外表面;

1.4 用無菌移液器將凍存管中的菌懸液盡量吸出。(吸出的菌懸液應(yīng)放入消毒液中并隨后進行高壓滅菌處理);

1.5 擰緊瓶蓋。記錄下接種細菌的詳細情況;

1.6 將接種完細菌的凍存管放在-20℃或-80℃冰箱中保存。

2、菌懸液保存法:

將復蘇好的試管的菌懸液,用滅菌好的甘油進行封存后放置冰箱2~8℃進行保存,保存時間為1個月。

3、斜面保存法:

將菌懸液用劃線方法進行斜面的接種培養(yǎng)后,用滅菌后的甘油進行保存放置冰箱2~8℃進行保存,保存時間為1個月。


保存條件

1、未經(jīng)使用的凍存管可在室溫保存12個月;已經(jīng)接種的凍存管在-20℃可保存12個月或-80℃可保存24個月;接種三次后冷藏保存,不可再冷凍保存;

2、在接種之前有如下情況產(chǎn)生,該凍存管不得使用:

a.瓶子有漏液情況發(fā)生;

b.凍存管內(nèi)的凍存保護液混濁;

c.超過有效保存期。

3、小瓷珠一旦從凍存管中取出,不得再放回凍存管中;

4、當丟棄使用過的或部分使用過的凍存管時,應(yīng)注意生物危險的預(yù)防。

5、廢棄液經(jīng)高壓滅菌后(121℃,30分鐘)丟棄。


備注

1、菌株來源中國醫(yī)學微生物菌種保藏管理中心的菌株干粉,菌株干粉默認為零代,對干粉菌株進行復活為第一代菌株,第一代菌株進行傳代并保存為菌株的第二代即現(xiàn)在的磁珠。

2、菌株為第二代,保質(zhì)期6個月,如發(fā)現(xiàn)污染或不活等現(xiàn)象,請1個月內(nèi)聯(lián)系我公司。

3、菌株操作應(yīng)在無菌條件下進行,防止雜菌污染。

4、本方法僅供參考,視情況可以通過其他合理途徑進行傳代和保存。

5、本公司出售的菌株僅用于科研、教學及衛(wèi)生微生物檢驗質(zhì)量控制。

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