■ 產(chǎn)品介紹
INVSC1是釀酒酵母菌株，屬于真核細(xì)胞。一般的針對原核生物的抗生素例如卡那和氨芐對酵母是無效的，因此為了防止大腸桿菌等原核生物對酵母培養(yǎng)菌株污染，往往會在培養(yǎng)基中加入一些氨芐和卡那霉素的抗生素，來抑制細(xì)菌菌的污染和生長。釀酒酵母適宜的生長溫度是28-30℃，一般使用30℃培養(yǎng)，溫度超過32℃可能導(dǎo)致細(xì)胞的死亡。INVSC1釀酒酵母是生長快速的雙倍體酵母細(xì)胞，是蛋白表達(dá)的理想菌株。INVSC1釀酒酵母是His, Leu, Trp和Ura營養(yǎng)缺陷型菌株，在缺乏組氨酸，亮氨酸，色氨酸和尿嘧啶的SC minimal media中無法生長。INVSC1釀酒酵母是非常理想的蛋白表達(dá)菌株，但是不應(yīng)該用于遺傳分析研究，因為該菌株的孢子形成不好。在制作INVSC1釀酒酵母甘油菌的時候，請不要使用4天以上的平板挑菌保存，盡量使用新鮮的平板。INVSC1的配套載體是pYES3/CT, pYC2, pYES2系列載體。pYES2質(zhì)粒與INVSc1酵母配套使用時，激活pYES2質(zhì)粒的GAL1啟動子的轉(zhuǎn)錄進而啟動下游重組蛋白的表達(dá)。INVSc1為合子型，可直接通過PEG/LiAc將pYES2質(zhì)粒轉(zhuǎn)化進入INVSc1細(xì)胞內(nèi)。質(zhì)粒pYES2的篩選標(biāo)志為URA，可用SD-URA板進行篩選。INVSC1釀酒酵母可在YPD培養(yǎng)基上生長，用化轉(zhuǎn)/電轉(zhuǎn)化的方法可將質(zhì)粒轉(zhuǎn)入酵母細(xì)胞中，用半乳糖誘導(dǎo)蛋白表達(dá)。用30%的甘油與培養(yǎng)物混合可保藏菌種。 |
基因型： | MATa his3Δ1 leu2 trp1-289 ura3-52/MATα his3Δ1 leu2 trp1-289 ura3-52 |
■ 基本信息
培養(yǎng)基: | YPD/YPDA |
菌株類別: | 酵母菌 |
培養(yǎng)條件: | 28-30℃，有氧，YPD/YPDA |
質(zhì)粒轉(zhuǎn)化: | 化轉(zhuǎn)/電轉(zhuǎn) |
保存方式: | 30%甘油，-80℃ |
基本應(yīng)用: | 用于蛋白表達(dá) |
■ 使用方法
收到菌液及時四區(qū)劃線活化，挑取單克隆在YPD中培養(yǎng)到生長對數(shù)中后期加入終濃度30%無菌甘油保種，分裝置于-80℃保存，避免反復(fù)化凍。建議超凈臺內(nèi)劃線涂板，避免雜菌污染。
■ 注意事項
1. 酵母菌在YPD培養(yǎng)基上會變粉，是正常現(xiàn)象，可以由此特性鑒別是否為酵母菌。
2. 酵母菌種化凍1-2次活性下降，不建議直接長期保存。
3. 活化保種的種管建議分裝保存，反復(fù)凍融菌株活力下降。
4. 本產(chǎn)品僅可用于實驗室研究，不能用于動物，人體以及作為食品添加劑等用途。
5. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
